检测项目：细胞增殖实验

检测周期：10-15个工作日出具检测报告，参考周期

检测费用：初检样品，初检之后根据客户检测需求以及实验复杂程度进行报价。

Cell Counting Kit-8(简称CCK-8)试剂可用于简便而准确的细胞增殖和毒性分析。

用途：药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验等。

一、所需设备及仪器

1. 10ul，100-200ul及多通道移液器

2. 酶标仪(带有450nm滤光片)

3. 96孔培养板

4. 二氧化碳培养箱

二、方法和步骤

实验一：细胞增殖分析

1、制备细胞悬液：细胞计数。

2、接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数(约1-2×104)，每孔约100ul细胞悬液，同样的样本可做4-6个重复。

3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养4小时，如果不需要贴壁，这步可以省去。

4、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议将枪头浸入培养液中加入且在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。或者直接配置含10%CCK8的培养基(现用现配)，以换液的形式加入。

5、培养0.5-4小时:细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认最佳条件(建议预实验先摸清楚时间点)。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间(5-6小时)。

6、测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。

实验二：细胞毒性分析

1、制备细胞悬液：细胞计数

2、接种到96孔板中：根据合适的铺板细胞数(约≥5×104)，每孔约100ul细胞悬液，同样的样本可做4-6个重复。

3、37℃培养箱中培养：细胞接种后贴壁大约需要培养4小时，如果不需要贴壁，这步可以省去。

4、加入不同浓度的毒性物质。

5、37℃培养箱中培养：加入毒性物质的培养时间，要看毒性物质的性质和细胞的敏感性，一般要根据细胞周期来决定，起码要一代以上的时间(例如：6、12、24、48、60、72小时)。

6、加入10ul CCK8：由于每孔加入CCK8量比较少，有可能因试剂沾在孔壁上而带来误差，建议将枪头浸入培养液中加入且在加完试剂后轻轻敲击培养板以帮助混匀。

7、培养0.5-4小时:细胞种类不同，形成的Formazan的量也不一样。如果显色不够的话，可以继续培养，以确认最佳条件。特别是血液细胞形成的Formazan很少，需要较长的显色时间(5-6小时)。

8、测定450nm吸光度：建议采用双波长进行测定，检测波长450-490nm，参比波长600-650nm。

我们的检测优势

1、中析研究所是双高新技术企业，检测资质齐全，实验室仪器先进，科研团队强大。

2、多家实验室分支，总部位于北京，在上海、广州、江苏、济南、四川等都有分支实验室。

3、初检样品，初检之后根据客户检测需求以及实验复杂程度进行报价。

4、检测周期短，检测费用低，实验方案齐全。

5、检测报告认可，支持扫码查询真伪，检测报告认可度高。

第三方检测报告用途

1、销售使用

2、研发使用

3、工业问题诊断

4、科研论文/市场抽检数据使用

5、投标竞标

6、项目工程等

检测流程

1、寄样

2、初检

3、报价

4、签订保密协议

5、开始实验

6、结束实验

7、后期服务

以上是对于细胞增值实验的相关介绍，如有其它检测需求可以咨询实验室工程师，为您一对一服务。

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